Главная



Иммунология и вакцинация

Активация сериновых эстераз

При активации тучных клеток посредством сшивки Fсе-рецепторов одним из самых ранних процессов, по-видимому, является активация мембранно-связанной эстеразы. Этот фермент ингибируется диизопропилфторофосфатом (ДФФ), который ковалентно связывается с сериновым остатком активного центра. Помимо эстеразы таким же образом ингибируются трипсин, химотрипсин, калликреин, плазмин и несколько других важных протеиназ. Путем активации аденилат-циклазы сериновая эстераза, как сейчас представляется, передает сигнал, вызывающий дегрануляцию тучных клеток. Кроме того, эстеразы, активируемые под действием внешнего сигнала, обнаружены также в тромбоцитах и нейтрофилах.

Имеются данные, согласно которым сериновая эстераза может быть активирована в течение нескольких минут после сшивки поверхностных иммуноглобулинов лимфоцита с помощью соответствующих антител. Поскольку ДФФ ингибирует резкое увеличение подвижности компонентов мышиных В-клеток, индуцируемое антителами против иммуноглобулинов, то возможно, что активация эстеразы необходима именно для повышения этой подвижности.

Кишимото и др. также показали, что при контакте В-клеток кролика с антителами против иммуноглобулинов в течение 30 мин начинает проявлять свою активность находящаяся в мембране сериновая эстераза, причем ее субстратная специфичность подобна таковой трипсина (т. е. эстераза расщепляет те пептидные связи, в которых карбонильная группа принадлежит аргинину или лизину). Этот фермент ингибируется ДФФ, однако ингибирование можно предотвратить с помощью небольших аргининсодержащих пептидов. Было показано, что мембраны клеток, обработанных антителами против иммуноглобулинов, взаимодействуют с цитоплазматической молекулой с мол. массой 150 кДа (даже в клетках, не обработанных антителами), высвобождая фактор с мол. массой 45 кДа, который активирует ядерную протеинкиназу через 2 ч после начала контакта с антителами. Эта киназа специфически фосфорилирует негистоновые белки хроматина, которые, по-видимому, прямо регулируют транскрипцию или репликацию ДНК. Такая модификация, возможно, представляет собой один из последних этапов активационной программы перед синтезом РНК и ДНК.

При активации с помощью Кон А, возможно, имеет место аналогичная последовательность событий. Между 4 и 8 ч после добавления Кон А наблюдается кратковременное усиление фосфорилирования ядерных негистоновых белков. В дальнейшем между 24 и 48 ч, как раз перед началом включения тимидина, фосфорилирование негистоновых белков опять возрастает, достигает своего максимального уровня. Этот процесс связан с четырехкратным увеличением активности связанных с хроматином протеинкиназ (без изменения количества ферментов), которое, как было показано, в свою очередь зависит от активации ядерной аденилат-циклазы.

Было бы весьма интересно проверить, имеется ли сходство между процессами, индуцируемыми с помощью Кон А в Т-клетках (активируется ли при этом сериновая эстераза?), и процессами, индуцируемыми с помощью антител против иммуноглобулинов в В-клетках (активируется ли при этом ядерная аденилат-циклаза?). В настоящий момент эта притягательная схема, возможно, поможет разгадать, как активационный сигнал может передаваться в ядро.