Главная



Иммунология и вакцинация

Материалы, оборудование, подготовка стеклянной посуды

Материалы и оборудование

Для работы необходимы: однополые мыши инбредных штаммов СВА, С57bl или DBA в возрасте 8—12 недель;
эритроциты барана в растворе Олсвера или в дефибринированной крови;
чашки Петри диаметром 50 мм (Anumbra, Венгрия);
колбы Эрленмейера объемом 25, 100, 500 и 1000 мл;
градуированные пипетки (1, 10 и 25 мл);
подставки для пипеток;
пипетки для подсчета эритроцитов и лейкоцитов;
стеклянный стерилизующий фильтр G5 (Saale — Glas, Иена, ГДР);
стеклянные стаканы объемом на 400 мл;
центрифужные пробирки (10 и 20 мл);
камеры для подсчета клеток по Biirker и Thoma;
силиконовые пробки для колб Эрленмейера;
шприцы (10 мл) с иглами № 16;
алюминиевая фольга;
бунзеновская горелка; ножницы;
пинцеты;
формы для льда;
чашки с замороженным льдом с плоской поверхностью льда;
среды Игла-MEM и Хенкса в сухом виде (Государственный институт иммунопрепаратов и питательных сред, Берлин);
сыворотка плода коровы (например, «Rehatuin» Reheis Chemical Company, Phoenix USA);
заменимые аминокислоты: Ser, Pro, Gly, Asp кислота (x. ч., или для культуры тканей);
L-глютамин, х. ч.; пируват натрия, х. ч.;
пенициллин, стрептомицин 2-меркаптоэтанол (Koch-Light, Англия);
NaHCО3;
2,5% раствор трипанового синего в 0,15 М NaCl;
тридистиллированная вода;
сухожаровой шкаф,
термостат,
настольная центрифуга,
микроскоп,
весы (тарирующие);
баллоны со сжатым воздухом, содержащим 7,5% СО2;
эксикатор диаметром 40 см;
лабораторное помещение,
приспособленное для стерильных работ.

Подготовка стеклянной посуды

Работы по культивированию требуют строгого соблюдения стерильности; можно использовать только безупречно чистые посуду и растворы. Стеклянную посуду ополаскивают водопроводной водой и кипятят в течение часа в растворе моющих средств. После повторного ополаскивания посуду замачивают в 20% серной кислоте не менее чем на 6 ч. Затем посуду тщательно моют водопроводной водой и дважды ополаскивают дистиллированной водой. Лабораторное стекло высушивают в сушильном шкафу при 100 °С до исчезновения воды и пятен конденсации пара, после чего посуду заворачивают в алюминиевую фольгу и стерилизуют 2 часа при 180 °С. Подготовленную таким образом посуду хранят в помещении, предназначенном для стерильных работ.