Главная



Иммунология и вакцинация

Выявление хемотаксических факторов

Выявление хемотаксических факторов. Методика
Выявление хемотаксических факторов. Оценка метода

Лейкоциты обладают способностью направленно перемещаться под действием хемотаксического раздражения in vitro. В отсутствие такого раздражения лейкоциты движутся беспорядочно, они начинают перемещаться в одном направлении под влиянием веществ, вызывающих хемотаксис. Хемотаксическое ориентирование происходит под воздействием градиента концентрации.

От хемотаксиса следует отличать хемокинез — усиленное. но ненаправленное движение клеток под влиянием некоторых веществ, содержащихся в окружающей среде. Хемотаксические факторы возникают in vitro при реакциях гуморального и клеточного иммунитета. Так, например, комплексы АГ — АТ (антитело) опосредованно, через активацию комплемента, оказывают хемотаксическое воздействие на нейтрофилы, макрофаги, эозинофилы, базофилы и лимфоциты. В реакциях клеточного иммунитета, протекающих in vitro, также могут образовываться хемотаксические факторы, стимулирующие все вышеперечисленные типы клеток.

В 1962 г. Boyden предложил использовать микропористые фильтры для изучения хемотаксиса. Метод основан на способности лейкоцитов проходить сквозь пористую мембрану в направлении градиента концентрации веществ, вызывающих хемотаксис. Мембрана разделяет камеру на две части, по одну сторону помещают лейкоциты, по другую— исследуемое вещество. Величина пор мембраны должна быть такой, чтобы лейкоциты проходили через нее только в результате активной миграции. Метод Boyden можно усовершенствовать, поставив второй фильтр.

Поскольку часть мигрирующих клеток отделяется от мембраны, они не полностью выявляются. Второй, непроницаемый для лейкоцитов, фильтр улавливает эти клетки. Проблему отделения клеток можно решить при помощи так называемого метода «Leading-front», в котором миграция клеток заканчивается до того, как лейкоциты достигнут нижней- поверхности мембраны.